中国科学院 上海巴斯德研究所 抗病毒免疫与遗传治疗研究组
研究课题
2006年，我们实验室的主要工作集中于HIV和禽流感研究的三个方向：
（1）开发基于膜结合抗体的抗HIV预防和治疗策略；
（2）研究流感血凝素（HA）亚型特异性的分子基础；
（3）设计基于假病毒的抗HIV免疫原。
1. 开发基于膜结合抗体的抗HIV预防和治疗策略
以前，我们将非中和性抗HIV-1 gp41抗体（TG15）引入内质网和反面高尔基网（TGN），证明引入到ER和TGN抗体抑制HIV-1（J. Immunol.160:1489）。最近，我们发现将这一抗体表达在HIV-1易感细胞膜上(膜结合抗体)显著抑制了HIV-1复制和细胞融合（J. Immunol. 173:4618）和树突状细胞表面的DC-SIGN介导的HIV-1捕获和转移（AIDS Res. & Hum. Retrovir. 22:874）。因此，当将这一非中和抗体表达于细胞表面时，能够成为广谱而有效的中和抗体，并抑制游离病毒和由树突状细胞（DC）捕获和转移病毒。
这一研究的长期方向是将这一膜结合抗体开发成一类新型的抗病毒药物。我们的近期主要目标是：
1.1 利用慢病毒载体将m-scFv基因导入人类原代T细胞，并检验其抗HIV-1活性。
1.2 开发HIV治疗和预防用糖基磷脂酰肌醇（Glycosylphosphatidylinositol,GPI）锚定scFv。我们证明嵌合scFv/DAF蛋白可以通过GPI锚定点表达于细胞表面。表达GPI-scFv的细胞可以显著抑制HIV感染。
1.3 构建抗HCV E1蛋白的m-scFV和GPI-scFv，并研究其抗HCV感染的作用。
2. 研究流感血凝素（HA）亚型特异性的分子基础
HA是病毒颗粒表面的三种病毒蛋白之一，在病毒进入细胞的过程中发挥关键作用。在患者体内，抗HA中和抗体能够清除病毒并预防感染。HA共有16种亚型，其中含有HA亚型1、2和3的病毒已经在人类中传播扩散。而含有HA亚型5、7和9的病毒也已由禽类传染人类，但是人与人之间的传播还未见报道。然而，令人感兴趣的是，HA亚型特异性的分子基础至今仍然未知。搞清楚HA亚型特异性的分子基础将对揭示禽流感的发病机制、开发新的诊断方法和疫苗有重要作用。
我们正通过构建HA嵌合体，并用其作为免疫原来研究HA亚型特异的决定簇。2006年，我们已经成功的开发了新的研究工具和实验方法，包括：
1）HA/NA/M2假慢病毒载体制备；
2）野生型和嵌合HA的cDNA构建；
3）基于假病毒的新型中和抗体检测方法。
3. 基于假病毒的抗HIV免疫原
数量稀少但广谱的抗HIV中和抗体的存在使人们对于开发出一种能诱导广谱中和抗体的疫苗报有希望。2006年我们设计了基于假病毒的免疫原，制备了多种表达野生型和突变包膜蛋白的假病毒，并且比较其表面表达和转导的效率。此外，在与假病毒表面一种抗HIV-1包膜抗体是否共表达的条件下，我们正在比较野生型包膜蛋白的表面表达、转导效率和免疫原性。
